生物安全实验室如何建设与管理？看苏州这家医院的实践答案~

党的十八大以来，党中央把加强生物安全建设摆上更加突出的位置。习近平总书记提出，“生物安全关乎人民生命健康，关乎国家长治久安，关乎中华民族永续发展，是国家总体安全的重要组成部分，也是影响乃至重塑世界格局的重要力量。要深刻认识新形势下加强生物安全建设的重要性和紧迫性，贯彻总体国家安全观，贯彻落实生物安全法，统筹发展和安全，按照以人为本、风险预防、分类管理、协同配合的原则，加强国家生物安全风险防控和治理体系建设，提高国家生物安全治理能力，切实筑牢国家生物安全屏障。”

本文以苏州市立医院为例，依据习近平总书记提出的“要加强对国内病原微生物实验室生物安全的管理，严格执行有关标准规范，严格管理实验样本、实验动物、实验活动废弃物，强化底线思维和风险意识”的要求，分析新形势下生物安全实验室的建设和管理要点。

苏州市立医院至今已有70年历史，2005年苏州市政府发文，将苏州市第二人民医院、第三人民医院、第四人民医院整合成立“ 苏州市立医院 ”。医院建筑面积27.8万平方米，职工总数4974名，开放床位2935张，为南京医科大学附属医院，设有本部、东区、北区、南区4个院区和1个独立的教学培训基地，是一所承担着医疗、教学、科研、公益四位一体功能的三级甲等综合医院。医院加强校地合作，与苏州市人民政府签署战略合作发展计划，实施市医疗卫生资源补短补缺"123"方案，通过“一个全面三个着力五大提升”的发展战略，打造苏州老百姓自己的大医院。

图1  院区建设现状

图2  "123"方案规划

图3  “一个全面三个着力五大提升”发展战略

实验室生物安全指实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护装置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染。

实验室建设要经过设计、施工/验收、备案三大阶段，每个阶段都要严格按照有关的标准和规范进行，其中设计阶段的工作主要内容包括需求分析（必要时报批）、风险评估、平面布局设计和深化设计；施工/验收阶段的工作主要内容涉及建筑、装修、空调、通风/净化、给水（纯水系统）、排水（废水处理）、气体供应、电气（UPS）、消防等；备案阶段主要是生物安全备案。

风险评估的目的是通过生物风险评估确定防护屏障的设置，人员应在哪一级的生物安全防护实验室中进行实验活动，一般以《病原微生物实验室生物安全通用准则》（WS233-2017）和《人间传染的病原微生物名录》为评估依据，其中WS 233-2017病原微生物实验室生物安全通用准则。

◆ 病原微生物危害程度分类

根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类，其中第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。

第一类病原微生物。指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。

第二类病原微生物。指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、 动物与人、动物与动物间传播的微生物。

第三类病原微生物。指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构 成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。

第四类病原微生物。指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。

◆风险评估要求

风险评估应以国家法律、法规、标准、规范，以及权威机构发布的指南、数据等为依据。对已识别的风险进行分析，形成风险评估报告。对于风险评估工作人员要求应由具有经验的不同领域的专业人员(不限于本机构内部的人员)进行。需进行风险评估的情况包括：病原体生物学特性或防控策略发生变化时;开展新的实验活动或变更实验活动(包括设施、设备、人员、活动范围、规程等);操作超常规量或从事特殊活动;本实验室或同类实验室发生感染事件、感染事故; 相关政策、法规、标准等发生改变。

(P1)BSL-1实验室:适用于操作在通常情况下不会引起人类或动物疾病的微生物。

(P2)BSL-2实验室:适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。注意加强型BSL-2实验室，BSL-2+负压高效过滤通风（WS-233-2017）。

(P3)BSL-3实验室:适用于操作能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。 

(P4)BSL-4实验室:适用于操作能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。

P2+实验室：加强型医学BSL-2实验室指在医学BSL-2实验室中,设置缓冲间、机械通风系统、排风高效过滤等措施且有明确负压或压力梯度要求的实验室，简称 P2+实验室。实验室的核心工作间是指防护区中从事病原微生物及样本操作的高风险区域。

表1  普通型与加强型BSL-2实验室的主要差异

依据《病原微生物生物安全管理条例》2019年3月19日第二次修订版规定，新建、改建或者扩建一级、二级实验室，应当向设区的市级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门备案。

《病原微生物生物安全管理条例》为生物安全实验室安全管理的法律依据，详细规定了实验室生物安全管理的责任落实、主管部门、分级分类管理以及样本运输等一系列要求。

图4 《病原微生物生物安全管理条例》部分内容

图5《病原微生物生物安全管理条例》部分内容

图6 《病原微生物生物安全管理条例》部分内容

生物安全实验室管理关注要点包括组织、人员、实验活动、设施设备、菌（毒）种和生物样本（感染性材料）、废弃物处置和安全保障。

实验室所在机构建立生物安全管理组织架构，设立生物安全委员会，建立适用的实验室生物安全管理体系，二级以下实验室经设区市卫生健康行政部门备案，并取得相应资格。严格组织管理，切实落实各责任人的职责，院长为生物安全法定责任人，医院生物安全委员会及其负责人（院长授权的主管领导），实验室负责人为实验室生物安全第一责任人，专业主管为实验室生物安全管理员。

上岗人员需持有市级以上卫生行政部门上岗证，同时对于人员准入要进行人员资格审查，有准入制度并签署知情同意书（本科人员由科主任签字准入、进修实习人员经培训后由主任或专业主管同意）。人员上岗以后，要安排培训考核，随时进行人员健康监护。

实验活动管理内容包括实验室风险评估和风险控制更新；实验室科研项目审查，国家合作项目审查；实验室实验活动档案（包括实验室使用、安全监督等所有记录）等。

一方面保障设施设备运行，进行设施设备使用记录和性能指标监控记录；另一方面进行设施设备更新、维护，如日常巡检、安全检查、定期校准和鉴定、定期维护保养。

◆ 生物安全柜

即负压过滤排风柜，防止操作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶，可分为I级、Ⅱ级、Ⅲ级。

I级生物安全柜，外部空气由操作窗吸进，前窗操作口向内吸入的负压气流保护操作人员的安全；排出气流经高效过滤器过滤后排出安全柜保护环境。工作状态时保证工作人员不受侵害，但不保证实验对象不受污染。

Ⅱ级生物安全柜，外部空气由操作窗吸进，前窗操作口向内吸入的负压气流保护操作人员的安全；经高效过滤器过滤的下降气流用于保护安全柜内实验物品；气流经高效过滤器过滤后排出安全柜以保护环境。工作状态下遵守操作规程时既保证工作人员不受侵害，又保证实验对象及环境不受污染。

Ⅲ级生物安全柜，属于全密闭、不泄露机构的通风柜。人员通过与柜体密闭连接的手套在安全柜内实施操作。下降气流经高效过滤器过滤后进入安全柜用以保护安全柜内实验物品。排出气流经两道高效过滤器过滤或经通过一道高效过滤器过滤再经焚烧处理，用于保护环境。箱内对外界保持负压可确保人体与柜内物品完全隔绝。

◆ 高压蒸汽灭菌器

要求按期检查和验证，作好记录，确保消毒效果和使用安全。一方面操作人员由各市劳动安全部门培训获得操作证；另一方面高压灭菌效果检测，每使用一次有物理和化学监测，每周一次生物监测。

菌（毒）种和生物样本（感染性材料）的管理要注意四个环节，即使用（包括来源、接受和使用记录等）、保藏（包括保藏条件、样本类型和数量等）、处置、运输（包括运输程序、人员资质、包装规格等）

废弃物处置要遵守废弃物管理规定，严格废弃物处置流程，并妥善保管废弃物处置记录。

安全保障要关注生物安全、消防安全和危化品，平日进行培训（相关知识、应急预案）和演练，及时进行意外事故处置并出具意外事故报告。